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一、常用的消毒灭菌的方法有哪些

消毒灭菌的方法(一)物理消毒灭菌法

利用物理因子杀灭微生物的方法.包括热力消毒灭菌、辐射消毒、空气净化、超声波消毒和微波消毒等。

1.热力消毒灭菌

高温能使微生物的蛋白质和酶变性或凝固(结构改变导致功能丧失)，新陈代谢受到障碍而死亡，从而达到消毒与灭菌的目的.在消毒中，热可分为湿热与干热两大类。

干热是指相对湿度在20%以下的高热，干热消毒灭菌是由空气导热，传热效果较慢.一般繁殖体在干热80-100℃中经1小时可以杀死，芽胞需160-170℃经2小时方可杀死。(1)燃烧法

是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法，因对物品的破坏性大，故应用范围有限。

烧灼法:一些耐高温的实验器械(金属、搪瓷类)，在急用或无条件用其他方法消毒时可采用此法.将器械放在火焰上烧灼1-2分钟.若为搪瓷容器，可倒少量95%乙醇，慢慢转动容器，使乙醇分布均匀，点火燃烧至熄灭约1-2分钟.采集作细菌培养的标本时，在留取标本前后(即启盖后，闭盖前)都应将试管(瓶)口和盖子置于火焰上烧灼，来回旋转2-3次。

燃烧时要注意安全，须远离易燃易爆物品，如氧气、汽油、乙醚等.燃烧过程不得添加乙醇，以免引起火焰上窜而致灼伤或火灾.锐利刀剪为保护刀锋，不宜用燃烧灭菌法。

焚烧:某些特殊感染，如破伤风、气性坏疽、绿脓杆菌感染的敷料，以及其它已污染且无保留价值的物品，如污纸、垃圾等，应放入焚烧炉内焚烧，使之炭化。(2)干烤法

电热烤箱：利用烤箱的热空气消毒灭菌。烤箱通电加热后的空气在一定空间不断对流，产生均一效应的热空气直接穿透物体.一般繁殖体在干热80-100℃中经1小时可以杀死，芽胞、病毒需160-170℃经2小时方可杀死.热空气消毒灭菌法适用于玻璃器皿、瓷器以及明胶海棉、液体石腊、各种粉剂、软膏等.灭菌后待箱内温度降至50-40℃以下才能开启柜门，以防炸裂。

微波消毒：微波是一种高频电磁波，其杀菌的作用原理，一为热效应，所及之处产生分子内部剧烈运动，使物体里外湿度迅速升高;一为综合效应，诸如化学效应、电磁共振效应和场致力效应。目前已广泛应用于食品、药品的消毒，用微波灭菌手术器械包、微生物实验室用品等亦有报告.若物品先经1%过氧乙酸或0.5%新洁尔灭湿化处理后，可起协同杀菌作用，照射2分钟，可使杀芽胞率由98.81%增加到99.98%-99.99%。

微波对人体有一定危害性，其热效应可损伤眼睛晶状体等，长时间照射还可致神经功能紊乱.使用时可设置不透微波的金属屏障或戴特制防护眼境等。

湿热消毒灭菌

由空气和水蒸气导热，传热快，穿透力强，湿热灭菌法比干热灭菌法所需温度低、时间短。

(1)煮沸法

将水煮沸至100℃，保持5-10分钟可杀灭繁殖体，保持1-3小时可杀灭芽胞.在水中加入碳酸氢钠至1%-2%浓度时，沸点可达105℃，能增强杀菌作用，还可去污防锈.在高原地区气压低、沸点低的情况下，要延长消毒时间(海拔每增高300m，需延长消毒时间2分钟).此法适用于不怕潮湿耐高温的搪瓷、金属、玻璃、橡胶类物品。

煮沸前物品涮洗干净，打开轴节或盖子，将其全部浸入水中.大小相同的碗、盆等均不能重叠，以确保物品各面与水接触.锐利、细小、易损物品用纱布包裹，以免撞击或散落.玻璃、搪瓷类放入冷水或温水中煮;金属、橡胶类则待水沸后放入.消毒时间均从水沸后开始计时.若中途再加入物品，则重新计时，消毒后及时取出物品，保持其无菌状态。

经煮沸灭菌的物品.“无菌”有效期不超过6小时。(2)高压蒸汽灭菌法

高压蒸汽灭菌器装置严密，输入蒸汽不外逸，温度随蒸汽压力增高而升高，当压力增至103-206kPa时，湿度可达121.3-132℃.高压蒸汽灭菌法就是利用高压和高热释放的潜热进行灭菌，为目前可靠而有效的灭菌方法.适用于耐高温、高压，不怕潮湿的物品，如敷料、手术器械、药品、细菌培养基等。

潜热是指当lg100℃的水蒸汽变成lg100℃水时，释放出2255.2J的热量。高压蒸汽灭菌的关键问题是为热的传导提供良好条件，而其中最重要的是使冷空气从灭菌器中顺利排出.因为冷空气导热性差，阻碍蒸汽接触欲灭菌物品，并且还可减低蒸汽分压使之不能达到应有的温度。

手提式高压蒸汽灭菌器:为金属圆筒，分为二层，隔层内盛水，有盖，可以旋紧，加热后产生蒸汽。锅外有压力表，当蒸汽压力升高时，温度也随之相应升高。该灭菌器体积小，可自发蒸汽，便于携带。

操作方法如下:在灭菌器中盛水3000ml;将拟灭菌的物品随同盛装的桶放入灭菌器内;将盖子上的排气软管插于铝桶内壁的的方管中;盖好盖子，拧紧元宝螺丝，勿使漏气;锅下加热，打开排气活门，放出冷空气(一般在水沸后排气10-15分钟左右)，关闭放气活门，使压力逐渐上升至103kPa，温度达121.3℃，维持20分钟后，排气至“0”时，慢慢打开盖子.如果突然开盖，冷空气大量进入，蒸汽凝成水滴，使物品潮湿，且玻璃类易发生爆裂。

卧式高压蒸汽灭菌器：其结构原理同手提式高压蒸汽灭菌器，因其体积大，一次可灭菌大量物品.操作人员须经专业培训，再关闭放气开关，待夹层压力表达到灭菌所需压力时(约10分钟后)，将蒸汽控制阀移至“消毒”位置，使蒸汽进入柜室，柜室内的冷空气及冷凝水可由柜室阻气器排出，待柜室的压力升到103-137kPa，温度达121.3～126.2℃时，转动压力调节阀，使压力与温度保持恒定.维持30分钟后，将蒸汽控制阀移至“排气”位置，排气毕，将蒸汽控制阀移至“干燥”位置;物品干燥后，将蒸气控制阀移至“关闭”位置，待压力指针到“0”位置和热空气排尽后，才能打开柜门，取出物品;关紧进气阀。

预真空式高压蒸汽灭菌器：在通入蒸汽前有一预处理阶段，即柜室内抽负压至2.6kPa(空气排除约98%)，所以，预真空高压蒸汽灭菌器除有下排气式所具备的灭菌系统、蒸汽输送系统、控制系统、安全系统和仪表监测指示系统外，增加抽负压系统和空气过滤系统.机器运转由电脑控制。

高压蒸汽灭菌锅的灭菌流程

高压蒸汽灭菌锅是利用饱和压力蒸汽对物品进行迅速而可靠地消毒灭菌的设备，适用于医疗卫生、科研、农业等单位。可对医疗器械、敷料、玻璃器皿、溶液培养基等进行消毒灭菌。

　　高压蒸汽灭菌锅按照样式和大小分为手提式高压蒸汽灭菌器、立式高压蒸汽灭菌器、卧式高压蒸汽灭菌器等。手提式高压蒸汽灭菌器的容积通常为18L、24L、30L。立式高压蒸汽灭菌器的容积范围通常为30L-200L，进一步又可分为手轮型、翻盖型、智能型。智能型又分为标准配置型、蒸汽内排型、真空干燥型。卧式高压蒸汽灭菌器通常为大型卧式高压灭菌锅。

　　高压蒸汽灭菌锅的灭菌操作程序

　　1.灭菌物品的包装和容器要合适

　　首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。需要灭菌的物品按需要分类包装，物品包装用线绳捆扎，以不松动散开为宜，不宜过紧，培养皿等器皿需要用牛皮纸包扎。

　　2.灭菌物品装放应合理

　　灭菌锅内物品不能过挤，不能超过锅内容量。尽量将同类物品装在同一锅内灭菌。若有不同类物品装放在一起，应以难达到灭菌物品的所需温度和时间为准。物品装放时，上下左右均应交叉错开，留出缝隙，使蒸汽容易穿透。大灭菌包应立着放上层，小包放下层，布类和金属类物品同时灭菌时，应将金属类物品包放在下层，使两者受热基本一致，并防止金属物品灭菌中产生的冷凝水弄湿包布。

　　加盖，并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。

　　3.排尽冷空气

　　打开电源加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气。使用高压蒸汽灭菌器时，关键的是将锅内空气排尽。如锅内有空气，则气压针所指的压强不是饱和蒸汽产生的压强。相同的压强，混有空气的蒸汽其温度低于饱和蒸汽所产生的温度。因此完全排除锅内空气使锅内全部是水蒸气，灭菌才能彻底。

　　常用方法是：关闭放气阀，通电后，待压力上升到0.05MPa时，打开放气阀，放出空气，待压力表指针归零后，再关闭放气阀。关阀再通电后，压力表上升达到0.1MPa时，开始计时，维持压力到的时间。

　　4.合理计算灭菌时间

　　待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。当锅内压力升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。

　　灭菌时间包括：穿透时间，从锅内达到灭菌温度开始到锅内难达到的部位也达到此温度所需要的时间；维持时间，即杀灭微生物所需要的时间，一般以杀灭嗜热脂肪杆菌芽胞所需时间来表示；安全时间，为使灭菌得到确切保证所需要增加的时间，一般为热死亡时间的一半，其长短视灭菌物品而定。

　　对易导热的金属器材的灭菌，不需要安全时间。在灭菌时间内，要注意观察压力表，以保持规定的压力，维持到灭菌时间为止。在灭菌过程中，如有压力、温度下降，应重新升温升压，重新计时。

　　5.开盖操作

　　达到灭菌时间后即可切断电源，一般当压力表的压力降至0之后，再打开排气阀。有时，在压力降到0.05MPa，可缓慢放出蒸汽，注意不要使压力降低太快，以致引起激烈的减压沸腾，使容器中的液体四溢。当压力降到零后才能开盖，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。取出培养基摆在平台上以待冷凝，不可以长久不取出，否则容易引起培养基成分变化以至无法制作斜面培养基。

　　如果因为久不放气导致锅炉内产生负压、盖子打不开，可以将放气阀打开，让空气进入，内外压力平衡后盖子就可以打开了。取无菌物品时，要严格无菌操作。同时应分类放置，顺序发放取用。

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