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材料：em菌种10克、1公斤容量的生物发酵容器、20公斤容量的生物发酵容器、红糖足量
A、菌种活化：取EM菌种10克、红糖0.1公斤、食盐1克、尿素3克、1公斤无菌的水中。注：（先把水加热到100°C后加入红塘0.1公斤、食盐1克、尿素3克，而后继续加热5分钟。冷却到37°C时再加入EM菌种），将混合好的原液加入发酵容器密闭发酵(35°C—37°C温度)1—3天，从第二天开始可以隔一天松动容器口放气减压一次，打开容器口时闻到有酸甜味即活化成功。可以作为液体菌种使用。
B、制作原液：将活化好的一公斤液体菌种加入二级发酵罐(密闭容器)(加水比例按1：10-20的比例加入)。二级发酵时培养基的配方：（10%的红糖--必须添加、0.3%的尿素、0.1%食盐或磷酸二氢钾！发酵温度35-37度！发酵时间1-3天！），从第二天开始可以隔一天松动容器口放气减压一次，打开容器口时闻到有刺鼻子的酸甜味即发酵扩培成功。成品发酵液标准:（气味：酸甜，PH值：3.0-4.0，活菌含量：大于100亿/ml） 注意要点： 1，水，深井水即可，如果是自来水请先静放24小时后，再用； 2，加入菌种时候，水温不得超过50度，以35-40度最好； 3，温度及发酵时间的关系：10度以下不发酵，10-15度需发酵15天；15-20度需发酵10天；20-25度需发酵1周；25度-30度需发酵5天；30-35度需发酵3天；
农用微生物菌剂国标（GB20287-2006）
上图为粉剂状态em菌种原种上图为液体状态em菌种原种菌种项目剂型液体粉剂颗粒有效活菌数(cfu)，亿/g(mL)≥100亿500亿1.0霉菌杂菌数，个/g(mL)≤0.1×100.2×100.3×10杂菌率，%≤1.02.03.0水分，%≤-10.013.0细度，%≥-8080pH值= 3.0~4.05.0-7.05.0~7.0保质期，月≥624a复合菌剂，每一种有效菌的数量不得少于10亿/g(mL)；以单一的胶质芽胞杆菌（Bacillusmucilaginosus）制成的粉剂产品中有效活菌数不少于20亿/g。
b此项仅在监督部门或仲裁双方认为有必要时检测。
发酵工程的基本流程如下：
1、菌种液的制备：选用适合生产的菌种，进行菌种的培养和接种，以获得大量的菌种液。
2、发酵罐的配置：根据生产工艺和菌种的要求，选择合适的发酵罐，配置适宜的培养基。
3、发酵罐的灭菌：通过高温高压或化学灭菌，消灭罐内的细菌和微生物，保证发酵过程的无菌。
4、接种：将高浓度的菌种液接种入发酵罐，使其开始快速生长和繁殖。
5、控制发酵条件：通过控制发酵罐内的温度、pH值、氧气供给等条件，为菌体的生长和代谢提供适宜的环境。
6、收割发酵液：在发酵合适的期间，根据需要，通过旋滤或离心等方式，将发酵液分离出。
7、后续处理：根据生产需要，对发酵液进行后续处理，如过滤、浓缩、纯化等，以得到最终的产品。
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