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手术器械、物品、敷料的灭菌法：
1.高压蒸气灭菌法 应用最普遍，效果可靠。高压蒸气灭菌器可分为下排气式和预真空式两类。后者的灭菌时间短，对需要灭菌的物品的损害轻微，但价贵，应用未普及。目前在国内广泛应用的为下排气式灭菌器，灭菌时间较长。这种灭菌器的式样很多，有手提式、立式和卧式等多种。但其基本结构和作用原理相同，由一个具有两层壁的能耐高压的锅炉所构成，蒸气进入消毒室内，积聚而产生压力。蒸气的压力增高，温度也随之增高。用蒸气压力104.0～137.3kPa（15～20lbf/in2）时，温度可达121～126℃，维持30分钟，即能杀死包括具有顽强抵抗力的细菌芽胞在内的一切细菌，达到灭菌目的。
高压蒸气灭菌器的使用方法略述如下：将需要灭菌的物品放入消毒室内，紧闭器门。先使蒸气进入夹套，在达到所需的控制压力后，将冷凝水泄出器前面的冷凝阀旋开少许，再将总阀开放，使蒸气进入消毒室。冷凝阀的开放是使冷凝水和空气从消毒室内排出，以确保消毒室所需的温度。此时，可看到夹套的蒸气压力下降，消毒室的蒸气压力上升。在消毒室温度表达到预选温度时，开始计算菌时间。灭菌时间终了后，让消毒室内的蒸气自然冷却或予以排气。在消毒室压力表下降到"0"位1～2分钟后，将门打开。再等10～15分钟后取出已灭菌的物品。由于余热的作用和蒸发，包裹即能干燥。物品灭菌后，一般可保留2周。
注意事项：①需要灭菌的各种包裹不应过大、过紧，一般应小于55cm＊33cm＊22cm；②放入灭菌器内的包裹，不要排得太密，以免妨碍蒸气透入，影响灭菌效果；③包内和包外各贴一条灭菌指示带（长约6～8cm），如压力达到时候15分钟时，指示纸带上即出现黑色条纹，表示已达灭菌的要求。包内放入用纸包好的升华硫磺粉物的检测温度的方法，因为所用的硫磺品种不同，多数的熔点为114～116℃，故结果有时并不可靠；④易燃和易爆炸物品如碘仿、苯类等，禁用高压蒸气灭菌法；锐利器械如刀、剪不宜用此法灭菌，以免变钝；⑤瓶装液体灭菌时，要医学教|育网搜集整理用玻璃纸和纱布包扎瓶口，如用橡皮塞的，应插入针头排气；⑥已灭菌的物品应做记号，以便识别，并需与未灭菌的物品分开放置，以免弄错；⑦要有专人负责，每次灭菌前，应检查安全阀的性能是否良好，以防锅内压力过高，发生爆炸。
高压蒸气灭菌法多用于一般能耐受高温的物品，如金属器械、玻璃、搪瓷、敷料、橡胶类、药物等灭菌。
2.煮沸灭菌法 常用的有煮沸灭菌器。但一般铝锅洗去油脂后，也可作煮沸灭菌用。本法适用于金属器械、玻璃及橡胶类等物品，在水中煮沸至高无上100℃后，持续15～20分钟，一般细菌可被杀灭，但带芽胞的细菌至少需要煮沸1小时才能杀灭。如在水中加碳酸氢钠，使成2％硷性溶液，沸点可提高到时候105℃，灭菌时间缩短至10分钟，并可防止金属物品生锈。高原地区气压低、沸点低，故海拔高度每增高300m，一般应延长灭菌时间2分钟。为了节省时间和保证灭菌质量，在高原地区，可应用压力锅来煮沸灭菌。压力锅的蒸气压力一般为127.5kPa，锅内温度能达124℃左右，10分钟即可灭菌。
注意事项：①物品必须完全浸没在水中，才能达到灭菌目的；②橡胶和丝线类应于水煮沸后放入，持续煮沸15分钟即可取出，以免煮沸过久影响质量；③玻璃类物品要用纱布包好，放入冷水中煮，以免骤热而破裂；如为注射器，应拔出其内芯，用纱布包好针筒、内芯；④灭菌时间应从水煮沸后算起，如果中途加入其他物品，应重新计算时间；⑤煮沸器的锅盖应严密关闭，以保持沸水温度。
感染动物实验完成后应采取高压灭菌的方法处理。
高压灭菌是指将物品置于密闭的高压灭菌容器中，利用高压饱和蒸汽使微生物中的蛋白质、核酸发生变性，从而杀灭微生物的方法。
高压灭菌的优势
该方法灭菌能力强，是最有效、应用最广的一种灭菌方法。加大蒸汽压力能提高蒸汽温度，增进杀菌效果。一般培养基在121°C（103.4kPa蒸汽压）灭菌维持30min即可一次达到完全灭菌，耐热的芽胞在30min内全部杀死。牛奶、明胶等培养基最好采用115°C灭菌1520min；含葡萄糖等单糖的培养基宜111113°C灭菌1520min，以免温度过高引起变质或分解。
使用高压蒸汽灭菌时，须先加适量水于灭菌器中，待灭菌物品放好后，关闭灭菌器，打开气门，将灭菌器内空气除尽后方可关闭气门，升温加压，调节热源或安全阀保持压力（温度）不变。灭菌结束后，停止加热，压力回零后，打开气门，最后开盖取出物品。
高压灭菌器
高压灭菌器有两大类：一种是较为先进的程控预真空压力蒸汽灭菌器，国外发达国家多已采用。灭菌器装有抽气机，用以通入蒸汽前先抽真空，便于蒸汽穿透。它具有灭菌时间短和损害物品轻微的优点，在物品安放拥挤和重叠情况下仍能达到灭菌，甚至有盖容器内的物品也可灭菌。整个灭菌过程采用程序控制，既节省人力又稳定可靠。国内最近投产JWZK-I2A型程控预真空压力蒸汽灭菌柜，性能良好。灭菌时最低真空度为8.0kPa(60mmHg)，最高温度为132～136℃。
另一种是目前广泛使用的下排气式高压灭菌器，其下部设有排气孔，用以排出内部的冷空气。分有手提式、立式和卧式等类型。手提式是小型灭菌器，全重12kg左右。立式是老式高压锅，使用时需加水16L左右。至于卧式高压灭菌器可处理大量物品，最为常用。结构上有单扉式和双扉式两种。后者有前、后两个门，分别供放入和取出物品之用。灭菌室由两层壁组成，中有夹套，蒸汽进入灭菌室内，积聚而产生压力。蒸汽的压力增高，温度也随之增高。蒸汽压达103.95～137.29kPa(1.06～1.40kgf/cm2)时，温度上升至121～126℃，维持30分钟，能杀灭包括耐热的细菌芽胞在内的一切微生物，达到灭菌目的。
一、灭菌前准备
1、排净污水;
2、加蒸馏水到指定水位;
3、将灭菌电源打开;
4、屏幕提示开门，检查室内是否洁净;
5、整理待灭菌包裹，捆扎不宜过紧，包皮采用透气性好的材料;
二、灭菌操作
1、待灭菌物品放于托盘上;
2、不允许重叠放置;
3、托盘应开口朝上或侧放;
4、每个托盘中至少放置一个指示卡;
5、橡胶管应确保是两头开口的空心管道，无拐弯、扭曲、打结;
6、敷料包垂直放于托盘上，避免与灭菌器内壁接触;
7、关门;
8、根据灭菌物品的不同，选择灭菌程序;
9、当屏幕显示“灭菌结束，可以开门”蜂鸣后，开门灯亮，即可开门，取出已灭菌物品.
三、灭菌工作
关上柜门，关闭电源开关，切断电源.
四、灭菌器的保养
1、每日维护
(1)用软布或纱布擦净门胶圈上的异物;
(2)用带清洁剂和水的纱布，将灭菌器的内壁、隔架、托盘表面擦拭干净，不要使用钢渣绒或钢刷以免损伤灭菌室内壁。
2、定期检查
(1)每周一次，清洁净水箱污水箱和抽真空过滤器；
(2)每月一次，检查安全阀；
(3)每年一次，紧固电线接头和检测通断状态。
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